العنوان بلغة أخرى: |
فعالية الطبقة السطحية كممنع ومساعد مناعي والمستخلصة من بكتريا Aeromonas Hydrophila المعزولة من مرضى الإسهال في محافظة بابل |
---|---|
المؤلف الرئيسي: | النوري، لبنى عادل جميل (مؤلف) |
مؤلفين آخرين: | تاج الدين، وجدان رضا (مشرف) , عبد، فريال جميل (مشرف) |
التاريخ الميلادي: |
2016
|
موقع: | الحلة |
التاريخ الهجري: | 1437 |
الصفحات: | 1 - 154 |
رقم MD: | 794740 |
نوع المحتوى: | رسائل جامعية |
اللغة: | الإنجليزية |
الدرجة العلمية: | رسالة ماجستير |
الجامعة: | جامعة بابل |
الكلية: | كلية العلوم |
الدولة: | العراق |
قواعد المعلومات: | Dissertations |
مواضيع: | |
رابط المحتوى: |
الناشر لهذه المادة لم يسمح بإتاحتها. |
المستخلص: |
أجريت هذه الدراسة على مرحلتين: المرحلة الأولى تضمنت دراسة بكتريولوجية ودراسة فسلجية أما المرحلة الثانية تضمنت دراسة مناعية. حيث تم في الدراسة البكتريولوجية والفسلجية جمع 349 عينة إسهال من مرضى مستشفى بابل للولادة والأطفال خلال فترة من كانون الأول 2014 إلى أيار 2015، حيث أظهرت النتائج وجود 11 (3.15%) عزلة موجبة لبكتريا Aeromonas hydrophila، بعد ذلك تم استخلاص الطبقة السطحية البروتينية من العزلات بطريقتين، وأظهرت النتائج أن محلول Sodium Dodecyle Sulphate (SDS) بتركيز 0.05% قد أعطى تركيز أعلى لبروتين الطبقة السطحية بالمقارنة مع كلوريد الليثيوم (5 مولاري). ومن ثم تم ترسيب بروتين الطبقة السطحية المستخلص الخام، وأن كبريتات الأمونيوم بنسبة إشباع 80% قد أعطت تركيز أعلى لبروتين الطبقة السطحية بالمقارنة مع الأسيتون المبرد بتركيز 95%. وتضمن هذا الجانب أيضا دراسة العوامل الفسلجية حيث تم حضانة وسط الإنتاجية الملقح ببكتريا A.hydrophila في درجات مختلفة من الحرارة (50، 45، 40، 37، 30، 25، 20، 15، 10، 5) درجة مئوية، (10، 7، 4، 1) pH، أوقات حضانة (30، 28، 24، 20، 16، 12، 8، 4) ساعة، في الحاضنة الهزازة والاعتيادية، وإضافة (الكلايسين، التايروسين، اللايسين، ألانين) وبتركيزين 0.5و11mg/. حيث أظهرت النتائج أن جميع هذه العوامل تؤثر على إنتاج بروتين الطبقة السطحية وأن أعلى تركيز تم الحصول عليه في درجة حرارة 37 درجة مئوية، pH 7، بعد مدة حضانة 24 ساعة، في الحاضنة الهزازة، بعد إضافة mg/ 11 من الكلايسين إلى وسط الإنتاج. أما الدراسة المناعية تضمنت دراسة الخصائص المستضدية للطبقة السطحية البروتينية والتحري عن دور البروتين الطبقة السطحية كمساعد مناعي. إذ تمت باستخدام 16 أرنب قسمت إلى أربعة مجاميع كل مجموعة تضمنت 4 أرانب، حيث حقنت المجموعة الأولى ببروتين الطبقة السطحية فقط، أما المجموعة الثانية فقد حقنت بالمستضد المقتول للبكتريا Sallmonella typhi فقط، والمجموعة الثالثة فقد حقنت بالمستضد المدمج المكون من بروتين الطبقة السطحية والمستضد المقتول، أما المجموعة الرابعة فحقنت بالمحلول الملحي الفسلجي واعتبرت كسيطرة، وبعد انتهاء مدة التمنيع تم التحري عن الاستجابة المناعية الخلطية والخلوية. وأظهرت نتائج كل الفحوصات المناعية المستخدمة في هذه الدراسة أن كل من بروتين الطبقة السطحية، المستضد المقتول للبكتريا S. typhi والمستضد المدمج (بروتين الطبقة السطحية + المستضد المقتول) قد أعطت زيادة معنوية بالمقارنة مع مجموعة السيطرة وعلى مستوى احتمالية P < 0.05. حيث تم التحري عن الاستجابة المناعية الخلطية من خلال عدة فحوصات تضمنت: التلازن المباشر بالأنابيب والتلازن الدموي المنفعل لتقدير عيارية الأضداد، وأظهرت النتائج أن كل من بروتين الطبقة السطحية والمستضد المقتول والمستضد المدمج قد أعطت نفس مستوى العيارية الجهازية والموضعية (5120 و512) على التوالي، إلا أنها أعطت زيادة بالمقارنة مع السيطرة (20 و2) على التوالي. وقد تم استخدام الطريقة اللونية لتقدير تركيز البروتين الكلي في عينات المصل والنتائج التي تم الحصول عليها لهذه المستضدات الثلاثة في هذا الاختبار بمعدل (69.50، 77.30، 72.32) على التوالي بينما مجموعة السيطرة بمعدل (42.25) وتركيز البروتين الكلي للكلوبيولين المناعي الإفرازي المستخلص من عينات الزائدة والنتائج التي تم الحصول عليها لهذه المستضدات الثلاثة في هذا الاختبار بمعدل (63.30، 78.22 و69.20) على التوالي بينما مجموعة السيطرة بمعدل (45.87). بالإضافة إلى ذلك فقد تم استخدام طريقة الانتشار المناعي لتقدير تركيز الكلوبيولين المناعي IgG في المصل. فقد كان تركيز IgG بمعدل (2365.5، 3505، 2916 mg/dl)، على التوالي بينما مجموعة السيطرة بمعدل (1662) mg/dl. أما الاستجابة المناعية الخلوية فقد تم التحري عنها من خلال الفحوصات التالية: اختبار الفعالية البلعمية والنتائج التي تم الحصول عليها لهذه المستضدات الثلاثة في هذا الاختبار بمعدل (42.25، 58.50 و63.00) على التوالي بينما مجموعة السيطرة بمعدل (22.75). وتم استخدام اختبار معامل الانقسام أيضا والنتائج التي تم الحصول عليها بمعدل (22.75، 37.50، 33.25) على التوالي بينما مجموعة السيطرة بمعدل (11.75). وأيضا تم استخدام تقنية الامتزاز المناعي المرتبط بالأنزيم (ELISA) لتقدير تركيز عناقيد التمايز Cluster of differentiation (CD) في المصل CD4 CD8,، وقد كان تركيز CD4بمعدل (9.37، 11.77، 17.36) ng/ml على التوالي بينما مجموعة السيطرة بمعدل (6.91)ng/ml ، بينما تركيز CD8بمعدل (22.86، 25.32، 29.74) ng/ml بينما مجموعة السيطرة بمعدل (12.3) ng/ml. وأخيرا تم استخدام اختبار الجلد حيث أظهرت النتائج أن هذه المستضدات الثلاثة أثرت في تفاعل الحساسية sensitivity للأرانب وقد أدت المستضدات المحقونة إلى زيادة معنوية في قطر الانتفاخ بعد 72، 48، 24، 4 ساعة مقارنة مع مجموعة السيطرة على مستوى احتمالية P < 0.05. بذلك بينت النتائج أن كل من بروتين الطبقة السطحية والمستضد المقتول والمستضد المدمج قد حفزت المناعة الخلوية والخلطية. |
---|