ارسل ملاحظاتك

ارسل ملاحظاتك لنا







تنقية البروتينات المفرزة "Esx H" و"Esx G" لبكتريا السل "Mycobacterium Tuberculosis"

المصدر: مجلة التربوي
الناشر: جامعة المرقب - كلية التربية بالخمس
المؤلف الرئيسي: الشريف، نعيمة محمد (مؤلف)
المجلد/العدد: ع18
محكمة: نعم
الدولة: ليبيا
التاريخ الميلادي: 2021
الشهر: يناير
الصفحات: 639 - 649
ISSN: 2011-421X
رقم MD: 1137046
نوع المحتوى: بحوث ومقالات
اللغة: العربية
قواعد المعلومات: EduSearch
مواضيع:
رابط المحتوى:
صورة الغلاف QR قانون

عدد مرات التحميل

2

حفظ في:
المستخلص: تسبب بكتيريا Mycobacterium tuberculosis مرض السل tuberculosis والذي يسبب وفاة أكثر من مليون شخص حول العالم سنوياً. يحتوي جينوم بكتيريا السل M. Tuberculosis على 23 جين (23 WXG genes) تشفر لبروتينات الــ Esx proteins، معظمها يتجمع كأزواج Pairs في الجينوم، يشفر Esx3 لبروتينات Esx G و Esx Hوهي ضرورية لنمو البكتيريا علي البيئات الصناعية وكذلك لها علاقة بتوازن وإمداد البكتيريا بأيونات الزنك والحديد. وأوضحت الدراسات البيوكيميائية والتركيبية أن هذه الأزواج تشكل معقدات متماسكة، حيث يشكل البروتين Esx H معقدا مع البروتين Esx G بنسبة 1:1 ويعتقد بأنه الشكل الوظيفي لهذه البروتينات. ولكون بكتيريا السل بطيئة النمو وكذلك تحتاج إلى معامل من الدرجة الثالثة من حيث الأمان الحيوي، لذلك هدفت هذه الدراسة إلى إنتاج البروتينات الإفرازية لبكتيريا السل Esx G و Esx H في بكتيريا Escherichia coii بغية تنقيتها واستخدامها مستقبلا لدراسة علاقتها بفوعة وإمراضيه هذه البكتيريا. ضخمت جينات الـ Esx (G&H) من جينوم بكتيريا Mycobacterium tuberculosis المتحصل عليها من بنك الجينات بواسطة تفاعل ال PCR. وذلك باستخدام بادئات نوعية حاوية على موقعي قطع أنزيمي القطع Nde Iو Xho I في النهايتين 5 و3 علي التوالي. ومن ثم لصق الجين المستهدف والبلازميد وأقحمت بداخل البكتيريا E. coli بالبلازميد الحامل للجين المستهدف pET-22b Esx (G&H). عبرت المستعمرات الايجابية عن البروتين المستهدف (20KDa) في السيتوبلازم من ثم أجريت تنقية البروتين باستخدام الكروماتو غرافيا ذات الألفة المعدنية، وقد اثبت نقاوة البروتين بترحيله على هلامة الاكريلاميد والكشف عنه بواسطة صبغة كوماسي الزرقاء comassi blue، من ثم فصل البروتين Esx H عن البروتين Esx G بواسطة أنزيم الترمبين.

ISSN: 2011-421X