ارسل ملاحظاتك

ارسل ملاحظاتك لنا







Genetic Profile Evaluation of Human Cell Lines Treated with Anastatica Hierochuntica Using Forensic DNA Fingerprinting Markers

العنوان بلغة أخرى: تقييم السمات الوراثية لخطوط الخلايا البشرية المعالجة بالأدوية باستخدام معلمات سمات الحمض النووي الجنائي
المصدر: المجلة العربية لعلوم الأدلة الجنائية والطب الشرعي
الناشر: جامعة نايف العربية للعلوم الأمنية - الجمعية العربية لعلوم الأدلة الجنائية والطب الشرعي
المؤلف الرئيسي: Rameshbabu, Saranya (Author)
مؤلفين آخرين: Ali, Mohammed S. (Co-Author), Alsaleh, Abrar B. (Co-Author), Venkatraman, Anuradha (Co-Author), Messaoudi, Safia A. (Co-Author)
المجلد/العدد: مج3, ع2
محكمة: نعم
الدولة: السعودية
التاريخ الميلادي: 2021
الصفحات: 231 - 244
ISSN: 1658-6786
رقم MD: 1239747
نوع المحتوى: بحوث ومقالات
اللغة: الإنجليزية
قواعد المعلومات: IslamicInfo, HumanIndex
مواضيع:
كلمات المؤلف المفتاحية:
علوم الأدلة الجنائية | مصادقة الخلايا المستزرعة | التكرارات المترادفة القصيرة | عدم استقرار المقاطع الوراثية | فقدان الزيجوت غير المتماثل | إضافة قاعدة نيتروجينية | نبات كف عائشة | Forensic Science | Cell Line Authentication | STRs | MSI | LOH | Insertion | Anastatica Hierochuntic
رابط المحتوى:
صورة الغلاف QR قانون

عدد مرات التحميل

1

حفظ في:
المستخلص: يعد توثيق الخط الخلوي باستخدام التكرارات المترادفة القصيرة (STRs) أداة ضرورية لضمان سلامة الخلية خلال عمليات الزراعة المستمرة، بالإضافة للتحقق من عدم وجود خطأ التعرف عليها وحدوث التلوث التداخلي. وتهدف هذه الدراسة إلى التحقق من وجود تغييرات على مستوى النمط الجيني لخلايا MCF-7 وHepG2التي قد تنتج عن مستخلص الميثانول من أوراق نبتة كف عائشة Anastatica hier-ochuntica (AH) باستخدام مواقع ال STR التي تستخدم عادة في الاستعراف. وعولجت خلايا MCF-7 و HepG2 خلال ثلاث فترات زمنية مختلفة بتراكيز متباينة من مستخلص ال AH. وتم استخلاص الحمض النووي من الخلايا الضابطة التي تم معالجتها بمستخلص الميثانول باستخدام أطقم QIAamp DNA Micro وتقديره الكمي باستخدام أطقم "Quantifiler Duo DNA Quantification" ثم تكثيره باعتماد أطقم AmpFlSTR Identifiler plus PCR Amplification ولوحظ تباين في تراكيز الحمض النووي لخلايا MCF-7 و HepG2بين المجموعة الضابطة والمعالجة بمستخلص ال AH إذ تراوحت بين 300 إلى 2400 μg/ml و150 إلى 2400 μg/ml خلال فترات المعالجة (24، 48، 72 ساعة) مع فروقات ذات دلالة إحصائية (p<0.05). ولوحظ وجود تغييرات من نوع عدم الاستقرار ل (MS)، وفقدان الزيجوت غير المتماثل (LOH) بالإضافة إلى عملية الإدخال والحذف في نتائج ال STR لخلايا MCF-7 وHepG2 المعالجة بتراكيز 1200 و2400 μg/ml خلال الفترات الزمنية 48 و72 ساعة وخلايا HepG2 خلال 24 و 48 و 72 ساعة من المعالجة. وبالتالي نستنتج أن التراكيز العالية من مستخلصات ال AH أثرت على الأنماط الوراثية للخطوط الخلوية، ما أدى إلى خطأ بالاستعراف. ولذلك فإن عملية مصادقة الخط الخلوي بواسطة تقنيات تحليل الحمض النووي الجنائي تؤدي دورًا حاسمًا للخلايا التي تم معالجتها بتراكيز عالية من المركبات الكيميائية. كما أنها تساعد المحقق الجنائي في التدقيق والتأكد من التغييرات المحتملة في الأنماط الوراثية لل STR للضحية أو المشتبه به الخاضع للعلاج الكيماوي لفترات طويلة.

Cell line authentication using Short Tandem Repeats (STRs) is necessary to ensure the integrity of the cell for its continuous culture and to identify misidentification and cross-contamination issues. This study investigates the changes in the genetic profile of MCF-7 and HepG2 cell lines caused by the methanolic leaf extract of Anastatica hierochuntica (AH) using human identification based STR markers. MCF-7 and HepG2 cell lines were treated with various concentrations of AH extracts for three different periods. The treated and control cells' DNA was extracted using a QIAamp® DNA Micro Kit, quantified using a Quantifiler Duo DNA Quantification Kit, and amplified using an AmpFlSTR Identifiler plus PCR Amplification Kit. The concentrations of the DNA extracted from control and MCF-7 and HepG2 cell lines treated with AH extract at 300 to 2400 μg/ml for 24hr and 150 to 2400 μg/ml for 48 and 72hrs were statistically significant (p<0.05). Microsatellite instability (MSI), loss of heterozygosity (LOH), insertion/deletions changes in the STRs profile were observed in treated cell lines at 1200 and 2400 μg/ml in MCF-7 cells for 48 and 72hrs and HepG2 cells for 24, 48, and 72hrs. We conclude that the highest concentration of AH extracts affected the genotype of the cell lines leading to misidentification. Therefore, cell line authentication by forensic DNA analysis techniques plays a decisive role for cells tested with a high concentration of chemical compounds and gives the forensic investigator an insight into these changes in the STR genotype of a victim/suspect who has been under long term chemotherapeutic treatment.

ISSN: 1658-6786