ارسل ملاحظاتك

ارسل ملاحظاتك لنا







Characterization and Purification of Lipase Enzyme Produced by Bacillus spp. Isolated From Raw Petrol

العنوان بلغة أخرى: تشخيص وتنقية إنزيم اللايبيز المنتج من أنواع بكتيريا الباسيلاس المعزولة من البترول الخام
المؤلف الرئيسي: Sabra, Fatima Mohammad Ahmad (Author)
مؤلفين آخرين: Massadeh, Muhannad Illayan (Advisor)
التاريخ الميلادي: 2011
موقع: الزرقاء
الصفحات: 1 - 71
رقم MD: 748018
نوع المحتوى: رسائل جامعية
اللغة: الإنجليزية
الدرجة العلمية: رسالة ماجستير
الجامعة: الجامعة الهاشمية
الكلية: عمادة البحث العلمي والدراسات العليا
الدولة: الاردن
قواعد المعلومات: Dissertations
مواضيع:
رابط المحتوى:
صورة الغلاف QR قانون

عدد مرات التحميل

52

حفظ في:
المستخلص: إنزيمات اللايبيز هي فئة من الإنزيمات التي تُحفّز التحلل المائي وتوزيع الجزيئات، وتوزيع الجزيئات التبادلي للدهون طويلة السلسلة. ويتميز إنزيم اللايبيز الذي تنتجه البكتيريا العصَوية (Bacillus) بأنّه مُستقر حراريًا، ويُظهر نشاطًا واستقرارًا في درجات مرتفعة من الحرارة والحموضة. وبالتالي فإنّ أهداف هذه الدراسة هي: إنتاج إنزيم اللايبيز من بكتيريا Bacillus spp. المَعزولة من البترول الخام وتشخيص الإنزيم المنتج وتنقيته. تمّ التعرف إلى البكتيريا المَعزولة على أنّها من الجنس Geobacillus ومن النوع stearothermophilus عن طريق دراسة الخصائص الشكلية والفيزيائية والكيميائية لها. وتمّت دراسة عوامل مُختلفة لتحسين إنتاج إنزيم اللايبيز مثل: درجة الحرارة ودرجة الحموضة ومصدر الكربون المُستخدَم ومُكونات أخرى مختلفة للوسط الغذائي، بالإضافة إلى مدة التخمير وحجم الوسط الغذائي. وكانت G. Stearothermophilus قادرة على إنتاج إنزيم اللايبيز بكميات مختلفة عند درجات حرارة ودرجات حموضة مُعينة، وقد سُجل أعلى نشاط لإنزيم اللايبيز عند استعمال زيت الزيتون كمصدر للكربون و إضافة مادة توين-٨٠ (Tween-80) على حرارة ٤٥ درجة مئوية ودرجة حموضة ٨٫٠ لمدة ٢٤ ساعة، وكانت قيمة الإنتاج ٩٠٫٦± ٠٫۱ وحدة/ميليلتر. أظهر إنزيم اللايبيز استقرارًا جيدًا للعديد من المتغيرات المدروسة، حيث احتفظ بأكثر من ٥٠% من نشاطه الأصلي عند حَضْنه لمدة ساعة على درجات حرارة مُختلفة، وبقي مُستقرًا عند درجة الحموضة ٨٫٠، حيث احتفظ الإنزيم بـ٩٩٫٦٤% من نشاطه في حين فقد استقراره بالكامل تقريبًا عند درجتي الحموضة ٦٫٠ و١٠٫٠، واحتفظ الإنزيم بثباته في المُذيبات العضوية المدروسة، وازداد نشاطه عندما تمّ حضنها في الآيزوبروبانول بتركيزي ٢٥% و۱٠٠%، كما احتفظ بأكثر من ۹٤% من نشاطه عندما حُضن مع مادة ايديتا (EDTA) وبقي مستقرًا في أيونات المعادن المدروسة. وتُظهر هذه النتائج إمكانية استعمال الإنزيم في الصناعات وغيرها من التطبيقات، كما أنّه مجال جيد للدراسات المستقبلية. تم تنقية إنزيم اللايبيز الذي يُفرز خارج خلايا G. Stearothermophilus عند طريق ترسيبه باستعمال كبريتات الأمونيوم من خلال إشباع المحلول بـ٤٠% من الملح، ثم باستعمال طريقة تبادل الأيونات الكروموغرافي (ion exchange chromatography) حيث أدّت هذه الخُطوات للحصول على إنزيم مُنقىً بـ٩٫٥٣ ضِعف مع نسبة استرداد ٢٫٤٩%، كما أظهر الفصل الكهربائي باستعمال جل دودسيل كبريتات الصوديوم متعدد الاكريلامايد (Sodium dodecyl sulfate-polyacrylamide gel electrophoresis) وجود شريطين، الكتلة الجزيئية لهما ۳٥ و ٥٠ كيلو دالتون.