العنوان بلغة أخرى: |
دور الأكتينوميستات كمبيدات حيوية في مقاومة ملوثات زراعة الأنسجة النباتية |
---|---|
المؤلف الرئيسي: | El Helafiy, Seham Setr Deghalieb (Author) |
مؤلفين آخرين: | Ismail, Mona A. (Advisor) , Hussein, Sonya H. M. (Advisor) |
التاريخ الميلادي: |
2012
|
موقع: | الطائف |
الصفحات: | 1 - 119 |
رقم MD: | 751764 |
نوع المحتوى: | رسائل جامعية |
اللغة: | الإنجليزية |
الدرجة العلمية: | رسالة ماجستير |
الجامعة: | جامعة الطائف |
الكلية: | كلية العلوم |
الدولة: | السعودية |
قواعد المعلومات: | Dissertations |
مواضيع: | |
رابط المحتوى: |
الناشر لهذه المادة لم يسمح بإتاحتها. |
المستخلص: |
استهدفت هذه الدراسة عزل وتعريف بعض الإستربتوميستات من ريزوسفير تربة لبعض النباتات التى يتم إكثارها بواسطة تكنيك زراعة الأنسجة، ومن ثم تقييم قدرتها على استخدامها كمبيدات افات لمقاومة نمو الملوثات سواء كانت بكتيرية أو فطرية المتواجدة فى زراعة الأنسجة. وللوصول الى هذا الهدف تم تنفيذ التجارب التالية: 1- عزل وتنقية بعض الإستربتوميستات من ريزوسفير بعض النباتات التى يتم إكثارها بواسطة تكنيك زراعة الأنسجة. 2- تجميع بعض الجارات المحتوية على مواد نباتية مجهزة بواسطة تكنيك زراعة الأنسجة والملوثة سواء كان بالبكتريا أو الفطريات أو كلاهما. 3- عزل وتنقية وتعريف جزئي لعدد من الملوثات المتحصل عليها. 4- تقدير النشاط التضادي للعزلات المتحصل عليها من الإستربتوميستات ضد الملوثات المعزولة. 5- تعريف افضل العزلات من الإستربتوميستات حتى النوع. 6- استخلاص الـ د ن ا من عزلات الإستربتوميستات المختارة. 7- تقدير البصمة الوراثية للعزلات المختارة باستخدام تقنية الـ RAPD-PCR 8- تعريف جزيئي لأحد العزلات باستخدام تقدير التتابع النيوتيدي لجين الـ 16S RRNA 9- اخيرا محاولة استخدام أحد العزلات فى مقاومة الملوثات بزراعة الأنسجة لبعض النباتات. وقد تم التوصل الى النتائج التالية: • تم عزل عدد 35 عزلة بكتيرية مشابهة فى نموها للإستربتوميستات من نوعين من التربة (تربة منزرعة وأخري غير منزرعة). • أوضحت النتائج أن 28 عزلة تم تنقيتهم وكانت 21 عزلة من التربة المنزرعة و 7 عزلات من التربة غير المنزرعة. • وكان أعلى عدد من العزلات الشبيه بالإستربتوميستات يتبع المجموعة الرمادية بعدد 13 عزلة يليها المجموعة البيضاء بعدد 11 عزلة وثلاثة عزلات حمراء وعزلة بنية اللون. • تم تجميع بعض الملوثات من مواد نباتية مجهزة بزراعة الأنسجة وملوثة سواء كان بفطريات أو بكتريا أو كلاهما من معمل زراعة الأنسجة، كما تم الحصول على ملوثات من جارات غير منزرعة بأية نباتات. • تم تنقية عدد 11 عزلة بكتيرية بحالة نقية وعرفت على انها عصويات موجبة لصبغة جرام, وأيضا خمسة فطريات تم تعريفها كاملا وثبت أنها: Aspergillus fumigates, Aspergillus flavus, Aspergillus nidulans, Aspergillus nidulans, Cladosporium herbarum • تلى ذلك تقدير النشاط التضادي للعزلات المتحصل عليها من الإستربتوميستات الـ 28 المنقاة ضد الستة عشرة عزلة ميكروبية سالفة الذكر. وقد ثبت أن عدد أربعة عزلات لم تظهر أية قدرة تضادية ضد البكتريا المختبرة الإحدي عشر، بينما ثبت قدرة 10 عزلات ضد عزلة بكتيرية واحدة. • تم إختيار العزلات 14 – 15 – 17 والتى اظهرت قدرة عالية ضد أربعة عزلات بكتيرية من الإحدي عشر والفطريات الخمسة المختبرة. • تم تحديد العزلات الثلاثة وتم تعريفها وثبت أنهم قد يكونوا سلالات من كل من Streptomyces noboritoensis, S. albolongus and S. griseorubiginosus على التوالى. • وبتقدير البصمة الوراثية للعزلات الثلاثة ثبت الحصول على 56 حزمة من الـ د ن ا منها 47 بولى مورفيك و9 مونومورفيك. وكانت موزعة بين البادئات السبعة المستخدمه بواقع 6 – 8- 9 – 12- 7- 7 – 7 للبادئات OPA11, OPB15, OPC07, OPC18, OPD04, OPE05 and OPO14, على التوالى. • وقد ثبت أن الحزم منها 31 حزمة يمكن إعتمادها كماركر موجب بينما وجد 16 حزمة تم إعتمادها كماركر سالب. • أوضحت شجرة الدندروجرام أن العزلتين 14 و 17 قد وقعتا فى كليستر واحد، بينما العزلة 15 كانت فى كليستر منفصل, • تراوحت النسبة المئوية للتشابه بين العزلات ما بين 25.8 الى 34.1. • تم بواسطة الـ PCR عزل جزئي لجين 16S rRNA من الـ د ن ا للعزلة 14 وتم تقدير التتابع النيوتيدي له وتم الحصول على 1443 نيوتيدة. • وقد تم الإقتراح بإعتبار العزلة 14 عزلة جديدة رمادية من الإستربتوميستات ويمكن تسميتها Streptomyces noboritoensis SSMA-KSA. • تم استخدام الراشح للعزلة 14 فى مقاومة الملوثات بزراعة الأنسجة فى الموز. وثبت أنها كانت اكثر كفاءة ضد الفطريات الملوثة لمزارع الأنسجة. |
---|