المستخلص: |
جمعت العزلات البكتيرية المرضية من طلبة الدراسات العليا باعتبارها عزلات مشخصة، نميت هذه العزلات لغرض تنشيطها في وسط المغذي السائل بدرجة حرارة 37°C لمدة 24 ساعة. تضمنت الدراسة الحالية التحري عن وجود الإنزيمات القاطعة في 14 عزلة من العزلات البكتيرية المرضية والسالبة لصبغة غرام. وأظهرت النتائج التي تم الحصول عليها أن عزلتين من Escherichia coli امتلكت قابلية لقطع الحامض النووي لامدا إلى قطعتين بقطع مشابه لإنزيم BmtI وNheI وقد تمت تسمية الإنزيم المستخلص EcoRHI. أظهر نتائج اختبار حساسية العزلات للمضادات الحياتية بأن عزلات E.coli كانت مقاومة بصورة كاملة لمضادات ampicillin, piperacillin. وكانت نصف عزلات E.coli مقاومة لمضادات amikacin, tetracycline, doxycycline, nalidixic acid وtrimethoprime/suphamethoxazol و30% من العزلات كانت مقاومة لمضاد gentamycin وعزلتين فقط كانت مقاومة trimethoprim وأظهرت الدراسة بأن كل العزلات من E.coli كانت حساسة لمضاد impenem. أما بالنسبة لبكتريا Morganella morganii كانت مقاومة لمضادات Ampicillin, amikacin, gentamicin, tetracycline, imipenem, trimethoprim وtrimethoprim/sulphamethoxazol ومتوسطة المقاومة لمضادات piperacillin وdoxycycline وحساسة لمضادات nalidixic acid. أظهرت دراسة حساسية عزلة Klebsiella pneumoniae مقاومة لمضادات tetracycline, ampicillin, trimethoprim, amikacin, Trimethoprin/sulphamethoxazol وpiperacillin وكانت حساسة لمضادات gentamicin, doxycycline, imipenem وnalidixic acid. Pseudomonas aeroginosa أظهرت هذه العزلة مقاومة لمضاداتampicillin, trimethoprim, tetracycline, nalidixic acid, وTrimethoprin/sulphamethoxazol وهذه العزلة كانت حساسة لمضادات amikacin, gentamicin, doxycycline, imipenem ومضاد Peperacillin. Serratia marcescens تم التحري عن قابلية تلك البكتريا في مقاومة المضادات وأظهرت النتائج أن هذه العزلة كانت مقاومة لمضادات ampicillin وtrimethoprim وكانت متوسطة المقاومة لمضاد impipenem وحساسة لمضادات amikacin, gentamicin, tetracycline, doxycycline, nalidixic acid, pepracillin ومضاد trimethoprin/sulphamethoxazol. أظهرت دراسة الجينوم البكتري للعزلات قيد الدراسة احتواء بعض العزلات على mega plasmid. الأنزيم القاطع EcoRHI تمت تنقيته بصورة جزئية من احدى عزلات E.coli المرضية كانت عدد مرات التنقية بحدود 87 مع استرداد مقداره 12.6% وتضمنت خطوات التنقية الجزئية الترسيب بكبريتات الأمونيوم بنسبة إشباع 50% تم استرجاعه بواسطة كروماتوغرافيا الترشيح الهلامي باستخدام عمود Sephadex G-100 وأظهر الترحيل الكهربائي باستخدام SDS-PAGE أن الإنزيم مكون من وحدة واحدة بوزن جزيئي 45 KDa.
|