| المستخلص: |
هدفت الدراسة الحالية إلى اختبار قدرة الفطرين P.expansum & A.terreus على إنتاج سم الباتيولين في بعض أصناف التفاح المستوردة والمتداولة في الأسواق المحلية لمحافظة بابل بعد دراسة خصائصها الجزيئية باستخدام تقنية ال PCR وTLC. أظهرت النتائج أن الفطر P.expansum هو الأكثر ظهورا وترددا بين الفطريات المعزولة إذ كانت أعلى نسبة ظهور له في التفاح الأحمر المستورد والتي بلغت 80% أما بالنسبة لفطر A.terreus فقد كانت أعلى نسبة ظهور له في التفاح الأصفر الذهبي المستورد إذ بلغت 20% بينما ظهر أعلى تردد للفطر P.expansum في التفاح الأحمر (68.75%) في حين كانت نسبة تردد فطر A.terreus (13.7%) في التفاح الأصفر الذهبي، ثم شخص الفطرين P.expansum & A.terreus جزيئيا إذ سجلت سبع عزلات فقط من مجموع 13 عزلة تعود لفطر P.expansum من خلال استخدام زوج بادئ الأول PER عند الوزن الجزيئي 400 bp أما بالنسبة للبادئ الثاني penEX فقد أعطى نتائج متوافقة مع الخصائص المظهرية والمجهرية عند الوزن الجزيئي 700 bp ولأربع عزلات فقط (Pe-2, Pe5-, Pe-6, Pe-8) في حين لم تعطي بقية العزلات نتيجة إيجابية. أما بالنسبة لفطر A.terreus فقد وجد أن 6 عزلات من مجموع 7 تعود إلى هذا الجنس من خلال استخدام البادئ SQE عند الوزن الجزيئي 100 bp، وقد وجد أن 4 عزلات فقد تحمل الجين ITS وقد كان ناتج البلمرة بحجم 600 زوج قاعدي أما بقية العزل فلم تظهر أي حزم. كما تمت دراسة تأثير درجات الحرارة والرقم الهيدروجيني ونوع الوسط الغذائي في معدلات نمو الفطرين P.expansum & A.terreus إذ ازداد نمو الفطر P.expansum مع ارتفاع درجة الحرارة لغاية 25م˚ ثم تضاءلت معدلات النمو مع ارتفاع وانخفاض درجات الحرارة في حين كان أفضل رقم هيدروجيني ملائم لنموه هو الرقم الهيدروجيني 8 تلاه الرقم الهيدروجيني 6 بينما كان أقل نمو له عند الرقم الهيدروجيني 4. كما درس نوع الوسط الغذائي الملائم لنمو الفطر وكان أفضل وسط هو وسط Malt extract agar (MEA) في حين كان أفضل نمو للفطر A.terreus عند درجة حرارة 30م˚ لجميع العزلات المدروسة تلتها الدرجة الحرارية 35م˚ بينما كان أقل نمو له عند درجة الحرارة 15م˚ في حين كان أفضل رقم هيدروجيني ملائم لنموه هو الرقم الهيدروجيني 6 وقد وجد أن أفضل وسط ملائم لنمو هذا الفطر هو وسط Sabourauds dextrose agar. كما أظهرت النتائج قدرة 4 عزلات للفطر P.expansum على إنتاج سم الباتيولين وهي B و D و E و F إذ بلغت نسبة إنتاج الباتيولين 90% أما بالنسبة لفطر A.terreus فقد تبين أن 3 عزلات كانت منتجة لهذا السم وهي B و C و D، وكذلك تم الكشف عن قابلية عزلات الفطرين على إنتاج سم الباتيولين بطريقة Polymerase chain reaction (PCR) باستخدام البوادئ P450, IDHI, G3PDH (MSAS) لكلا الفطرين P.expansum & A.terreus فقد أثبتت نتائج تقنية PCR وجود الجين (IDH) المسؤول عن إنتاج سم الباتيولين في 4 عزلات لفطر P.expansum من مجموع 13 عزلة حيث لوحظ أن موقع الجين قد ظهر عند القاعدة النيتروجينية 500 bp كما أثبت وجود الجين MSAS في عزلتين عند القاعدة النيتروجينية 300 pb أما بالنسبة للجين G3PDH فقد تم الحصول على 4 عزلات حاملة لهذا الجين في حين لم يثبت امتلاك عزلات هذا الفطر للجين P45O. أما بالنسبة للفطر A. terreus فقد وجد أن 5 عزلات تحمل الجين IDH عند موقع جزيئة الدنا القياسي ذات الحجم 600 زوجا قاعديا وعزلتين تحملان الجين MSAS وهذه الجينات هي المسؤولة عن تشفير سم الباتيولين بينما لم تظهر عزلات الفطرين امتلاكها للجين P450. كذلك تم التحري عن قابلية عزلات الفطرين P.expansum & A.terreus على إنتاج ثلاث أنواع من الأنزيمات وهي Amylase وProtease وLipase.
|
