| المستخلص: |
تضمنت الدراسة 34 عينة جمعت من ترب مناطق مختلفة لمحافظة ذي قار، واختيرت قابلية العزلات البكتيرية على إنتاج إنزيم الاندوكلوكاينيز Endo-β-1,4-glucanase بعد تنميتها على وسط آكار CMC وباستخدام صبغة الكونغو الأحمر Congo red وNaCl ظهرت 24 عزلة قدرتها على تحليل وسط CMC بفعل إنتاجها إنزيم الاندوكلوكاينيز Endo-β-1,4-glucanase وشخصت هذه العزلات مظهريا وباستخدام الاختبارات الكيموحيوية وجهاز الفايتك2 VITEK2 والمجهر الإلكتروني بأنها بكتريا B. subtilis، كما شخصت العزلات باستخدام الاختبارات البايوجزيئية المتمثلة بتقنية PCR وبعد استخلاص الحامض النووي DNA من العزلات وضخم بجهاز PCR وباستخدام البادئات 27F (Forward) و1492R (Reverse) كانت جميع العزلات في الدراسة الحالية موجبة لهذا الجين وأن حجم الجين لجميع العزلات كان عند 1500 pb، وبعد تحديد التسلسلات الجينية ومقارنتها مع البيانات المتاحة في البنك الجيني Gen Bank، إذ أوضحت بيانات NCBI بأنها سلالات جديدة عائدة إلى بكتريا B. subtilis وسجلت ست عزلات منها في NCBI ورسمت لكل عزلة الشجرة التطورية بواسطة برنامج MEGA6. غيرت الظروف المثالية لإنتاج إنزيم الاندوكلوكاينيز Endo-β-1,4-glucanase من فترة الحضانة ودرجة الحرارة والرقم الهيدروجيني وتركيز مادة الأساس والتهوية ومصادر الكاربون والنتروجين، وقدرة الفعالية الإنزيمية باستخدام كاشف DNS للكشف عن جزيئات سكر الكلوكوز المتحرر بفعل إنزيم الاندوكلوكاينيز Endo-β-1,4-glucanase لقد تم إنتاج الإنزيم بعد تنمية العزلات البكتريا على أوساط زرعية تحتوي على المخلفات النباتية (Plant waste) والورق المقوى (Cardboard) كمصادر طبيعية للكاربون وبديلة للمصادر الصناعية المكلفة وبتركيز 1% وبدرجة حرارة ˚C 45 ولمدة 48 ساعة و(6-5) pH، ظهرت قشور بذور الحنطة (Wheat bran) وقشور البذور الدخن (Millet bran) أعلى فعالية إنزيمية تراوحت بين 0.32 U/ml – 0.70 U/ml متفوقة على المصادر الكاربونية البديلة الأخرى كقشور بذور القطن (Peel seeds of cotton) ومخلفات نبات الذرة (Corn stover) والورق المقوى وبذور نبات القرع (Pumpkin Seeds) ونشارة الخشب (Sawdust) التي لم يظهر عليها أي نمو لجميع العزلات، كما استخدمت بعض المصادر الطبيعية والصناعية بديلا لمصدر النتروجين الصناعي المتمثل بالببتون (Peptone) وبتركيز 1%. وجاءت خلاصة الشعير (Malt extract) كأفضل مصدر نتروجيني لجميع العزلات في الدراسة الحالية متفوقة على جميع المصادر النيتروجينية الأخرى، إذ تراوحت فعاليتها الإنزيمية بين0.93 U/ml -0.72 U/ml ، وجاءت بعدها بذور نبات القطن (Cotton seeds) ومسحوق عظام الدجاج (Chicken bones) والتي أظهرت نتائج جيدة كمصادر بديلة وغير مكلفة، وكذلك خلاصة الخميرة (Yeast extract) وفول الصويا(Soybean) ، أما قشور الموز (Banana peel) لم تظهر أي نمو لجميع العزلات. وأخيرا حققت الدراسة نتيجة طيبة من خلال الثبات أهمية بعض المخلفات الطبيعية كمصادر كاربون ونتروجين ناجحة ورخيصة التكلفة لتنمية العزلات البكتيرية والاستفادة من نواتجها المهمة بعدما جمعت في وسط مرق الإنتاج المحلي.
|
