| المستخلص: |
تعتبر قشور الأسماك والقشريات البحرية من المخلفات الغذائية التي تؤدي إلى تلوث بيئي ملحوظ , و أظهرت التحاليل الكيميائية لمخلفات قشور الأسماك أنها تحتوي على الكيتين بنسبة (18-21 % ) . وبما أن الكيتين عبارة عن بوليمرات يمكن تكسيرها أو تحللها إلى مواد أو سكريات أبسط يمكن استغلالها كمصدر خام لبعض الصناعات في المجالات الطبية , الصناعية والعلمية . اهتم هذا البحث في العمل على التحلل الحيوي الميكروبي لمخلفات قشور الأسماك باستخدام سلالة ميكروبية معزولة من تربه محليه ,وتم عزل وتنقية ثمانية عزلات فطرية أثبتت قدرتها على النمو واستخدام مخلف قشر السمك كمصدر وحيد للكربون وهي: Aspergillus oryzae Aspergillus terreus , Aspergillus niger , sp. Absidia. Pencillium chrysogenium, Rhizopus sp. sp. Mucor,sp. Fusarium, استطاع الفطر Aspergillus terreus إنتاج إنزيم كيتينيز نشط بمعدل (1.01 Umin) مقارنه بباقي العزلات الفطرية , وكذلك أعلى محتوى بروتين خارج الخلايا (1.301 mgml) , وأعلى وزن جاف للفطر (393g@ml) واستخدمت هذه السلالة في جميع تجارب البحث . ولمعرفة أفضل المنابت الغذائية لهذه السلالة اختبرت ستة بيئات مختلفة التركيب من حيث الكم والنوع وأظهرت النتيجة فعالية البيئة الرابعة بنسبة نشاط إنزيمي (1.37وحده / دقيقه) خلال 96 ساعة , كما تم دراسة استخدام أحجام مختلفة من مخلف قشور الأسماك (كمصدر وحيد للكربون) وأشارت النتائج أن أفضل نشاط إنزيمي عند استخدام المخلف كامل بدون طحن بمعدل (1.370 Umin). ودرس تأثير المزارع المهتزة والساكنة على نشاط إنزيم الكيتينيز حيث دلت النتائج على تقارب ملحوظ للنشاط الإنزيمي في كلا الحالتين ,كما تم دراسة تركيز العناصر التي تتركب منها أفضل بيئة ومعرفة تأثير تداخلها بعضها البعض ومدى تأثيرها على إنتاج إنزيم كيتينيز نشط باستخدام التصاميم الإحصائية (بلاكيت – برمن , بوكس - بينكن ) حيث أعطى الإنزيم نشاط عالي (2.736 Umin ) خلال 96 ساعة باستخدام تصميم بلاكيت-برمن. إما باستخدام تصميم بوكس- ببنيكن ارتقى النشاط الإنزيمي للكيتينيز حتى (5.308 Umin) خلال 90 ساعة , واختص جزء من هذا البحث بدراسة لبعض خواص الكيتينيز الخام تشمل تركيز الأنزيم , تركيز مادة التفاعل , درجة الحرارة , الأس الهيدروجيني , زمن التفاعل, درجة الثبات الحراري للأنزيم وتأثير وجود بعض العناصر الثقيلة على نشاط إنزيم الكيتينيز الخام . حيث كان أفضل نشاط للإنزيم عند درجة حرارة 50مْ عند زمن تفاعل 10 دقائق.كما أن زيادة نشاط الإنزيم تشكل علاقة خطيه مع تركيز الإنزيم, وأفضل تركيز لمادة التفاعل وجد عند تركيز0.5mg من مخلوط التفاعل , كما إن الرقم الهيدروجيني المناسب لنشاط الإنزيم pH 6 واثبت الإنزيم قدرته على الثبات الحراري عند 60مْ لمدة 60 دقيقة , ثم بعد دراسة تأثير بعض العناصر الثقيلة على نشاط إنزيم الكيتينيز الخام , اتضح أن نشاط إنزيم الكيتينيز الخام يزداد في وجود تركيز 1-10 M من ايونات النحاس (Cu2+ ), وايونات الكالسيوم (Ca2+ ) , وايونات الزنك ( Zn2+ ) , وايونات المنجنيز (Mn2+ ) بمعدل 1.3 مره تقريباً . أما ايونات الصوديوم (Na2+ ) وايونات البوتاسيوم (K2+ ) فليس لها تأثير كبير على نشاط إنزيم الكيتينيز . كما أشارت النتائج أيضا إلى أن إضافة كل من مادة EDTA , وايونات الكادميوم (Cd2+ ) , الزئبق (Hg2+ ) والرصاص (Pb2+ ) تسبب انخفاض شديد في نشاط الإنزيم .
|
