Purification and Characterization of Organic Solvent Tolerant Extracellular Lipase from Bacterial Isolate K5B4
| العنوان بلغة أخرى: |
تنقية وتوصيف أنزيم الليبيز خارج الخلوي المحتمل للمذيبات العضوية والمفرز من العزلة البكتيرية K5b4 |
|---|---|
| المؤلف الرئيسي: | الرواشدة، صدام عطاالله حمد (مؤلف) |
| مؤلفين آخرين: | الخليفات، خالد محمد عوض (مشرف) |
| التاريخ الميلادي: |
2016
|
| موقع: | مؤتة |
| الصفحات: | 1 - 45 |
| رقم MD: | 954779 |
| نوع المحتوى: | رسائل جامعية |
| اللغة: | الإنجليزية |
| الدرجة العلمية: | رسالة ماجستير |
| الجامعة: | جامعة مؤتة |
| الكلية: | عمادة الدراسات العليا |
| الدولة: | الاردن |
| قواعد المعلومات: | Dissertations |
| مواضيع: | |
| رابط المحتوى: |
عدد مرات التحميل
3
| المستخلص: |
تم في هذا المشروع تنقية أنزيم اللايبيز الخارج خلوي المنتج من سلالة البكتيريا Acinetobacter sp. K5b4 باستخدام تقنية الترشيح وتشمل كل من Ultrafiltration و Sephadex G-50. تم رصد النشاط الأنزيمي مبكرا في عينات الراشح رقم 8 و9 و10و 11. التحليل البروتيني للعينات 8 و9 و10 و11 دل على وجود حزمة واحدة من البروتين وبحجم نسبي يساوي KDa 133. تم تنقية أنزيم اللايبيز 8.99 مرات وبنسبة استرجاع تصل إلى 30.3% في عينة الراشح رقم 10. تم حساب قيمة Km وVmax للأنزيم النقي، ووجدت كالتالي 4.0 (mM) و73.53 (nmol/ml/min). الأنزيم النقي أظهر زيادة في النشاطية في وجود 20 و40 و60% (v/v) من المذيبات العضوية methanol و DMSO و acetone، في حين المذيبات العضوية ethanol و acetonitrile و propanol سببت نقصان في نشاط الأنزيم. أقصى نشاطية للأنزيم تم تسجيلها عند درجة الحموضة المثلى 7.0 ودرجة حرارة 27 درجة مئوية مع استقرار في نشاط الأنزيم على درجة حموضة من 6.5 إلى 7.0 ودرجة حرارة أقل من 30 درجه مئوية. تم وصف زيادة بسيطة إلى عدم تأثير في نشاط الأنزيم بوجود كل من الأملاح التالية KCl و BaCl2 و MgCl2 في حين أملاح الـــ CoCl2 و ZnCl2 و MnCl2 و CuCl2 سببت نقصان بسيط إلى متوسط (تراوح بين 10-20%) في نشاطية الأنزيم. أما في حالة إضافة الملح CaCl2 فإنه تم رصد زيادة مميزة في نشاطية الأنزيم وصلت إلى 36%. لم يوصف أي أثر تثبيطي على نشاط الأنزيم في حالة إضافة 1.0 و5.0 mM من المركبات 2-Mercaptoethanol و EDTA. وبنتيجة مشابهة فإن إضافة 1.0 mM من SDS لم يظهر أي أثر تثبيطي على نشاط الأنزيم في حين إضافة mM 5.0 من SDS سببت انخفاض شديد في نشاطية الأنزيم بنسبة تصل إلى 80%. الأنزيم أظهر نشاطية في تحليل كل من المواد المتفاعلة p-nitrophenyl esters ذوات السلاسل الكربونية 8 و12 و16 مع أفضلية في النشاطية ظهرت في حال استخدام p -nitrophenyl caprylate ذو السلسلة الكربونية المكونة من 8 كربونات. حقيقة أن الأنزيم قد أظهر درجة عالية من النشاطية والاستقرار في وجود مجموعة من المذيبات العضوية والتي تشمل methanol و DMSO و acetone هي تدعم إمكانية استخدام هذا الأنزيم كعامل مساعد في التصنيع العضوي والتي يستعمل فيها مثل هذه المذيبات العضوية كوسط للتفاعل. |
|---|
عناصر مشابهة
-
Purification and Characterization of Organic Solvent Tolerant Extracellular Lipase from Local Fungal Isolate
بواسطة: المجالي، رهام أحمد منشور: (2018) -
Screening, Selection and Production of Extracellular Methanol and Ethanol Tolerant Lipase from Acinetobacter sp. K5b4
بواسطة: Al Ananzeh, Maysa'a Rateb منشور: (2014) -
Characterization and Purification of Lipase Enzyme Produced by Bacillus spp. Isolated From Raw Petrol
بواسطة: Sabra, Fatima Mohammad Ahmad منشور: (2011) -
Characterization of Organic Solvent Extracts and Protein Extracted from Omani Seaweed "Hypnea Bryoides"
بواسطة: Al Mawali, Hala Hilal Khalaf منشور: (2022) -
Studies on Microbial Lipases
بواسطة: El Makhzangy, Attia Mohamed Attia منشور: (1989)
