المستخلص: |
في هذا الدراسة تم تنقية انزيم اللايبيز الخارج خلوي جزئيا المنتج من سلالة الفطر Pleurostoma richardsiae R10-1 بمقدار 6.1 ضعف. وتم حساب كل من قيم ال Km وVmax من Michelis-Menten plot والتي كانت 225 μM و13 nmol/mL/min على التوالي ومن Lineweaver-Burk plot كانت μM و 16.4 nmol/mL/min على التوالي باستخدام p-nitrophenyl laurate (p-NPL) كماده متفاعله، أظهرت النتائج أن الإنزيم المنقى جزيئا كان إلى حد ما ثابت بوجود المذيبات غير القطبية ولكن حساس بشكل متوسط للمذيبات القطبية، كان الإنزيم نشط في pH تتراوح 7-5 مع pH الأمثل ودرجة الحرارة كانت 6.0 و35˚ C على التوالي وأكثر ثباتية في بيئة حمضية 5.0 و6.0 pH في درجة حرارة حتى 40˚ C فما دون. أما الأملاح المعدنية مثل MgCl2, BaCl2 CoCl2, KCl وCuCl2 سببت اختزال في نشاط الأنزيم أما MnCl2 وCaCl2 أدت إلى تحسن من نشاط الإنزيم. فيما يخص المركبات SDS, EDTA و2-mercaptoethanol فقد أدت إلى انخفاض في نشاط الإنزيم مشيرا إلى أن الإنزيم قد يكون بروتين معدني ويحتوي على مجموعة SH ذات أهمية لتركيب ونشاط الإنزيم. أظهرت النتائج أيضا أن الأنزيم يفضل العمل على مركبات ذات سلسة كربون قصيرة مثل p-nitrophenyl caprylate (C8) وحقيقة أن الإنزيم مقاوم لدرجات الحرارة العالية في pH حامضية وكذلك إلى حد ما قدرته على تحمل المذيبات غير القطبية والقطبية يشير إلى أن هذا اللايبيز من المحتمل أن يكون ذا فائدة في العديد من تطبيقات التكنولوجيا الحيوية.
|