| المستخلص: |
إن ارتفاع مستوى البروتين المسمى ب Neuropillin-1 (NRPl) يرتبط بمراحل متقدمة جدا من تطور الأورام السرطانية الخبيثة في العديد من السرطانات بما في ذلك سرطان الثدي. وعلى الرغم من ذلك، فإن الآلية الجزيئية التي تدفع بتقدم وانتشار سرطان الثدي ليست محددة بشكل جيد حتى الآن. NRPl هو بروتين متعدد الوظائف ويعمل بمثابة مستقبل مشترك لعدد من عوامل النمو بما في ذلك عامل نمو بطانة الأوعية الدموية VEGF-165 وعامل النمو التحويلي TGFβl β. في هذه الدراسة، تفترض أن NRPl يمكن أن يكون العلامة البيولوجية المحتملة لسرطان الثدي ويمكن أن يساهم في مسار المرحلة الانتقالية Epithelial to Mesenchymal Transition (EMT). فقد قمنا بدراسة أثر وجود NRPl في ثلاثة أنواع من خلايا سرطان الثدي التمثيلية في المختبر. وقد تم ذلك عن طريق زيادة إنتاج هذا البروتين مخبريا في خلايا سرطان الثدي (MCF-7 وBT-474) المعروفة بإنتاجها لكميات معتدلة أو قليلة من هذا البروتين على التوالي. تمت هذه التجربة من خلال استنساخ هذا الجين بطوله الكامل (NRPl cDNA) وكذلك النوع الذائب منه (s12 NRPl) باستخدام البلازميد pPTuner IRES2. إضافة إلى ذلك فقد تم تثبيط ال NRPl في الخلايا MDA-MB-231 (المعروفة بالإنتاج الزائد لهذا البروتين) بطريقة ثابتة باستخدام نوعين من سلاسل shRNA والتي تستهدف مناطق مختلفة من هذا الجين. أظهرت نتائج western blot أن كمية NRPl زادت بشكل ملحوظ في الخلايا BT-474 مقارنة بالخلايا MCF-7 عند إدخال البلازميد المحتوي على الطول الكامل لهذا الجين. في المقابل لوحظ وجود انخفاض كبير في مستوى ال NRPl في الخلايا MDA-MB-231 عند إدخال shNRPl-U6-1. لوحظ أن زيادة إنتاج هذا البروتين أدى إلى انخفاض غير متوقع في قدرة الخلايا على التضاعف بينما تقليل نسبته في الخلايا المتنقلة الخبيثة (Metastatic) MDA-MB-231 أدت إلى نقصان ملحوظ في تضاعف الخلايا. من أجل الكشف عن الاختلاف في التعبير الجيني ل NRPl وبعض الجينات الأخرى المرتبطة ب (EMT) وتكوين ممرات الأوعية الدموية مثل (VEGF, TGFβl, ZEBl, PLGF, PDGF-A, PDGF-B, FGFR1a, FGFR1β) تم استخدام تقنية ال RT-qPCR. أظهرت النتائج انخفاض تدريجي في التعبير الجيني لمستوى NRPl و TGFβlبين الثلاثة أنواع من الخلايا المستخدمة بحيث أن المستوى كان عالي جدا في خلايا MDA-MB-231 تليها خلايا MCF-7 وBT-474.كما أظهرت النتائج ارتفاع مستوى التعبير الجيني لبقية الجينات الأخرى باستثناء PDGF-B في الخلايا الخبيثة MDA-MB-231 مقارنة مع خطوط الخلايا الأخرى الغير منتشرة (Non-metastatic). إن النتائج التي توصلنا إليها تدل على أنNRPl له علاقة في عملية (EMT) ولذلك فهو بروتين مرشح بأن يكون علامة بيولوجية مناسبة للكشف عن تطور مرض سرطان الثدي. وقد يكون هدفا للعلاج أيضا وذلك بتقليل نسبته عبر المضادات الجسمية له.
|
